規格：96T/48T

產品用途：僅供科研檢測，不得用于臨床

公司服務：ELISA試劑盒 免費代測檢測

檢測樣本種類：血清，血漿，尿液，組織勻漿，細胞上清液，灌洗液，糞便等樣本

力波生物供應種屬有：大鼠，小鼠，豚鼠，兔，犬，猴，豬牛羊，雞鴨鵝，植物，魚，昆蟲ELISA試劑盒等

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）檢測試劑盒

本試劑僅供研究使用  標本：血清或血漿及相關液體

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒試驗原理：

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒是采用雙抗夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）方法。

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒內容及其配制

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒操作注意事項

1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀釋過后的標準品應丟棄，不可保存。

2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

3． 不用的其它試劑，應包裝好或蓋好，不同批號的試劑不要混用，保質前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液，使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7． 底物A易揮發，避免長時間打開蓋子，底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒，實驗完成后應立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1、 血  清-----操作過程中避免任何細胞刺激，使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血  漿----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測，1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液--1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿--－將組織加入適量生理鹽水搗碎，1000×g離心10分鐘，取上清液。

5、 保  存----如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-80 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血，如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾，不要在37℃或更高的溫度加熱解凍，應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒試劑的準備

1． 標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存，稀釋前將標準品振蕩混勻，稀釋比例按說明書要求進行。

2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

兔內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）ELISA試劑盒操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，每個標準品和空白孔建議做復孔，每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體，蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次，如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5． 每孔加入50ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次，如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。